From the Guidelines
Bakteriyofajların saklanması için gliserol kullanılması etkili bir yöntemdir ve optimal korunma için 10-15% gliserol çözeltisi içinde -80°C'de uzun süreli saklama yapılmalıdır. Bu yöntemin uygulanması, steril gliserolün yüksek titreli bir faj lizatına eklenmesi, homojen dağılım sağlamak için nazikçe karıştırılması ve ardından dondurma için kriyo tüplere aktarılmasıdır. Bu yöntem genellikle birkaç yıl boyunca faj canlılığını korur 1. Gliserol, donma sırasında faj partiküllerine zarar verecek buz kristallerinin oluşumunu önleyerek çalışır ve aynı zamanda düşük sıcaklıklarda faj proteinleri ve nükleik asitlerin yapısal bütünlüğünü korur. Çalışma stokları için, fajlar several haftadan aylara kadar uygun tampon çözelti içinde 4°C'de saklanabilir. Saklanan fajları geri alırken, bunları oda sıcaklığında hızla çözmek ve canlılıklarını kaybetmemek için hemen kullanmak önemlidir. Uzun süreli saklanan stoklar için düzenli canlılık testleri, deneysel veya terapötik uygulamalar için etkili kaldıklarından emin olmak için önerilir.
- Bakteriyofajların saklanması için gliserol kullanırken aşağıdaki noktalar dikkate alınmalıdır:
- Gliserol konsantrasyonu 10-15% olmalıdır 1.
- Saklama sıcaklığı -80°C olmalıdır.
- Faj lizatına gliserol eklenirken nazikçe karıştırılmalıdır.
- Saklanan fajlar oda sıcaklığında hızla çözdürülmeli ve hemen kullanılmalıdır.
From the Research
Gliserol ile Bakteriyofajların Saklanması
Bakteriyofajların saklanması için çeşitli yöntemler kullanılmaktadır. Bu yöntemlerden biri de gliserol ile saklamadır.
- Gliserol, bakteriyofajların saklanması için kullanılan bir cryoprotectanttır 2.
- Ancak, gliserolün bakteriyofajlar üzerindeki etkileri hakkında yeterli bilgi bulunmamaktadır.
- Bir çalışmada, Pseudomonas aeruginosa-specific myovirus (PEV1, PEV20) ve podovirus (PEV31) phajların organik solventlere karşı stabiliteleri investigación edilmiştir 3.
- Bu çalışmada, gliserolün phajlar üzerindeki etkileri doğrudan investigación edilmemiştir.
- Ancak, bir başka çalışmada, dimethyl sulfoxide (DMSO), glycerol, ethylene glycol, ve propylene glycol gibi cryoprotectantların insan granülositlerine karşı membran permeabiliteleri investigación edilmiştir 4.
- Bu çalışmada, gliserolün insan granülositlerine karşı membran permeabilitesi 1.0 μm/min olarak bulunmuştur.
- Bir başka çalışmada, polyampholytes'in mammalian hücrelerin cryopreservationinde cryoprotective ajan olarak kullanılabileceği gösterilmiştir 5.
- Ancak, bu çalışmada da gliserolün bakteriyofajlar üzerindeki etkileri doğrudan investigación edilmemiştir.
- Sonuç olarak, gliserol ile bakteriyofajların saklanması hakkında yeterli bilgi bulunmamaktadır ve daha fazla araştırma yapılması gerekmektedir.