Il metodo migliore per dosare gli anticorpi anti-Borrelia è il test sierologico a due livelli (two-tiered testing)
Il metodo standard raccomandato consiste in un algoritmo a due livelli: primo livello con test ELISA (o IFA) ad alta sensibilità, seguito da Western blot (immunoblot) ad alta specificità come secondo livello se il primo risulta positivo o equivoco 1, 2.
Algoritmo diagnostico standard
Primo livello: ELISA
- Test iniziale: ELISA che misura la risposta anticorpale complessiva (IgM e IgG) contro antigeni di B. burgdorferi 1
- Antigeni utilizzati:
- Sonicato cellulare completo (più comune, alta sensibilità ma specificità subottimale)
- Antigeni ricombinanti specifici come VlsE o peptide C6 (specificità superiore con sensibilità simile) 1
- Vantaggio: Facilmente automatizzabile e fornisce valori quantitativi oggettivi
Secondo livello: Western blot
- Quando eseguirlo: Solo se ELISA risulta positivo o equivoco 1
- Perché è necessario: Aumenta la specificità a >98%, riducendo i falsi positivi del primo livello 1
- Cosa rileva: Anticorpi contro proteine specifiche preselezionate di B. burgdorferi
Performance diagnostica
Quando eseguito correttamente secondo le linee guida, questo approccio a due livelli raggiunge 1:
- Sensibilità: 70-100% per malattia di Lyme disseminata
- Specificità: >95-99%
- Limitazione importante: Sensibilità ridotta (40-61%) nella fase acuta precoce con eritema migrante
Alternative emergenti
Algoritmo a due ELISA
Un approccio alternativo utilizza due test ELISA sequenziali (sonicato cellulare seguito da C6 ELISA) invece del Western blot 1:
- Specificità comparabile (99-100% nei controlli)
- Può semplificare il processo diagnostico
- Ancora in fase di validazione rispetto allo standard
Test su antigeni ricombinanti multipli
Test immunoblot a singolo passaggio con antigeni ricombinanti da multiple specie di Borrelia mostrano sensibilità superiore rispetto ai test standard a due livelli, specialmente nella malattia precoce 3, ma richiedono ulteriore validazione clinica.
Caveat clinici fondamentali
Non testare pazienti a bassa probabilità pre-test: Il test sierologico non dovrebbe essere usato come screening in assenza di sospetto clinico appropriato 2
Eritema migrante tipico: La diagnosi è clinica, non serve conferma sierologica 2
Timing critico: Nella fase acuta precoce (<2-3 settimane), la sensibilità è bassa; considerare test su campione convalescente se il primo è negativo 2
Interpretazione delle IgM: Le IgM dovrebbero essere considerate solo se i sintomi sono presenti da <1 mese per evitare falsi positivi 1
Test non raccomandati per uso diagnostico di routine:
- PCR su sangue o urina
- Test di rilevamento antigene nei fluidi corporei
- Test di trasformazione linfocitaria
- Coltura (tranne indicazioni specifiche come biopsie cutanee) 4
Neuroborreliosi di Lyme
Per sospetta neuroborreliosi, il test anticorpale su siero rimane il metodo diagnostico raccomandato piuttosto che PCR o coltura su liquor o siero 2. Test su antigeni ricombinanti multipli possono migliorare la sensibilità diagnostica nel liquor 5.
L'approccio a due livelli rimane lo standard di cura validato, con specificità eccellente quando interpretato nel contesto clinico appropriato.