Identificación de las beta-lactamasas TEM IRT en Antibiograma
Para identificar una beta-lactamasa TEM IRT (Inhibitor-Resistant TEM) en un antibiograma, se debe buscar un patrón de resistencia a las combinaciones de penicilinas con inhibidores de beta-lactamasas, mientras se mantiene la sensibilidad a cefalosporinas 1.
Características fenotípicas clave
Las beta-lactamasas TEM IRT presentan un patrón distintivo en el antibiograma:
Resistencia a:
- Aminopenicilinas (amoxicilina, ampicilina)
- Combinaciones con inhibidores de beta-lactamasas (amoxicilina-ácido clavulánico, ampicilina-sulbactam, piperacilina-tazobactam)
- La CMI para amoxicilina-ácido clavulánico suele ser ≥ 8/4 μg/mL 2
Sensibilidad conservada a:
- Cefalosporinas de primera a cuarta generación
- Carbapenémicos
- Monobactámicos (aztreonam)
Métodos de detección
1. Pruebas fenotípicas
Prueba de disco combinado (CDT): Comparar los halos de inhibición de amoxicilina sola versus amoxicilina-ácido clavulánico. Una diferencia menor a 5 mm sugiere la presencia de una IRT 3.
Método modificado de inactivación de carbapenémicos (mCIM): Útil para descartar la presencia de carbapenemasas y orientar hacia otras beta-lactamasas 3.
2. Pruebas genotípicas (más precisas)
PCR: Amplificación del gen blaTEM seguida de secuenciación para identificar mutaciones específicas en las posiciones 69,244,275 y 276, que son características de las IRT 4, 5.
LATE-PCR con sondas lights-on/lights-off: Permite detectar mutaciones específicas de IRT en un tubo cerrado único, generando perfiles de fluorescencia característicos 6.
Microarrays de ADN: Identifican los polimorfismos de nucleótido único (SNPs) asociados con las variantes TEM IRT en aproximadamente 3.5 horas 7.
Mutaciones características de TEM IRT
Las principales mutaciones que confieren el fenotipo IRT incluyen:
- Sustitución en la posición 244: Arg→Cys (IRT-1/TEM-31), Arg→Ser (IRT-2/TEM-30), Arg→Thr (TEM-41) 5
- Sustitución en la posición 69: Met→Leu (IRT-14/TEM-45) 2
- Sustitución en la posición 275: Arg→Gln (IRT-14/TEM-45) 2
Algoritmo para la identificación
- Sospecha inicial: Resistencia a amoxicilina-ácido clavulánico con sensibilidad a cefalosporinas
- Confirmación fenotípica:
- Realizar pruebas de sinergia con inhibidores de beta-lactamasas
- Verificar la sensibilidad a cefalosporinas de espectro extendido
- Confirmación genotípica:
- PCR y secuenciación del gen blaTEM
- Identificación de mutaciones específicas en posiciones 69,244,275 o 276
Consideraciones importantes
Las pruebas genotípicas son preferibles cuando están disponibles, mientras que las pruebas fenotípicas pueden usarse en entornos con recursos limitados 3.
Es crucial diferenciar las TEM IRT de las BLEE (Beta-Lactamasas de Espectro Extendido), ya que las TEM IRT mantienen sensibilidad a cefalosporinas, mientras que las BLEE confieren resistencia a cefalosporinas de tercera generación 1.
La detección precisa de TEM IRT es fundamental para guiar la terapia antibiótica adecuada, evitando el uso innecesario de carbapenémicos cuando otras opciones terapéuticas siguen siendo efectivas 3, 1.