How to assess basophilic activity?

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Evaluación de la Actividad Basofílica

La actividad basofílica se evalúa principalmente mediante el test de activación de basófilos (BAT), que mide la degranulación basofílica por citometría de flujo, y mediante la cuantificación de mediadores liberados como histamina, triptasa sérica y leucotrienos. 1, 2

Métodos Principales de Evaluación

Test de Activación de Basófilos (BAT)

  • El BAT es un ensayo funcional que mide el grado de degranulación tras estimulación con alérgeno o controles mediante citometría de flujo, detectando marcadores de activación como CD63 en 150-2000 basófilos en <0.1 ml de sangre fresca 1, 2

  • La prueba correlaciona directamente con la liberación de histamina y proporciona dos parámetros principales: reactividad basofílica (%CD63+ basófilos) y sensibilidad basofílica (EC50) 1

  • El BAT puede utilizarse para diagnóstico de alergias alimentarias, a venenos, medicamentos y urticaria crónica, así como para monitorizar la respuesta a inmunoterapia específica y tratamientos biológicos 1, 2

  • Esta prueba es más específica que las pruebas de sensibilización porque considera todas las características de IgE y alérgeno, reduciendo la necesidad de procedimientos in vivo que pueden causar reacciones alérgicas de severidad impredecible 1, 2

Medición de Mediadores Liberados

Histamina

  • La histamina plasmática comienza a elevarse dentro de los 5 minutos y permanece elevada durante 15-60 minutos tras la activación 3

  • La liberación de histamina puede medirse mediante métodos fluorométricos en sangre completa, basófilos purificados o mediante citometría de flujo 4

  • La cinética de liberación varía según el estímulo: anti-IgE induce liberación lenta (t1/2 >240 segundos) mientras que fMLP produce liberación casi instantánea (t1/2 <10 segundos) 5

Triptasa Sérica

  • Un aumento de triptasa sérica en el momento de la reacción por encima de 1.2 × valor basal + 2 μg/L se considera clínicamente relevante para confirmar degranulación de mastocitos 3

  • La triptasa debe medirse durante el evento agudo y compararse con un valor basal posterior 3

  • Valores basales elevados pueden indicar trastornos de mastocitos o insuficiencia renal crónica 3

Leucotrienos Cisteinílicos

  • El LTE4 es el leucotrieno cisteinílico más estable y se utiliza para monitorizar esta vía en plasma u orina porque sus precursores (LTC4 y LTD4) son muy transitorios 3

  • Los niveles urinarios de LTE4 frecuentemente están aumentados en pacientes con mastocitosis sistémica 3

  • En anafilaxia sistémica, los niveles de leucotrienos cisteinílicos aumentan en 6 de 8 pacientes cuando se miden 2 horas después del inicio 3

Prostaglandina D2 y Metabolitos

  • El 11β-PGF2α (metabolito de PGD2) puede ser más sensible que la triptasa o los leucotrienos para detectar activación de mastocitos 3

  • Los niveles de 11β-PGF2α alcanzan su pico en la recolección de orina de 0-3 horas post-evento 3

Métodos Histológicos

  • La tinción con azul de toluidina permite evaluar la infiltración de células basofílicas en tejidos, contando el número de células basofílicas en preparaciones de epitelio 3

  • La tinción con Giemsa se utiliza para evaluar infiltración eosinofílica concomitante 3

Consideraciones Prácticas

Momento Óptimo de Muestreo

  • Para mediadores preformados como triptasa e histamina, es crítico comparar niveles agudos (durante el evento) con niveles basales 3

  • Para mediadores lipídicos de nueva generación, la comparación con nivel basal puede no ser tan crítica, aunque se requiere más investigación 3

Limitaciones y Precauciones

  • La inmunoterapia reduce la liberación de mediadores de basófilos y mastocitos a pesar de la persistencia de niveles significativos de IgE específica, lo que es relevante para la fase inmediata de reacciones alérgicas 3

  • Existe variabilidad entre donantes en la extensión de liberación de histamina tras estimulación, con algunos individuos mostrando fenotipo "no liberador" 5, 6

  • El BAT requiere validación analítica, validación clínica, estandarización de procedimientos y aseguramiento de calidad para garantizar reproducibilidad y confiabilidad de resultados 1, 2

Aplicación Clínica Integrada

  • La basogranulina se secreta junto con histamina en respuesta a estímulos dependientes e independientes de FcεRI, proporcionando un marcador válido de activación basofílica que podría distinguir entre activación de basófilos y mastocitos 6

  • La correlación entre basogranulina e histamina liberadas es altamente significativa (r=0.901, P<0.0001) 6

  • En el contexto de basofilia periférica, el test de activación basofílica puede ser útil para diagnosticar condiciones alérgicas, mientras que la detección del cromosoma Philadelphia y BCR-ABL debe considerarse para descartar leucemia mieloide crónica 7

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