¿Dónde se realiza una trampa coloide?
Una "trampa coloide" (colloid trap) ocurre en los ensayos celulares cuando los agregados coloidales no pueden penetrar las membranas plasmáticas de células de mamíferos, quedando atrapados en el espacio extracelular donde pueden interferir con los objetivos de membrana como los GPCRs. 1
Mecanismo de la Trampa Coloide
- Los agregados coloidales no aparentan penetrar las membranas plasmáticas de mamíferos, pero pueden limitar la actividad de fármacos en ensayos basados en células 1
- Estos agregados pueden perturbar objetivos de membrana específicos, particularmente los receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) 1
- La trampa coloide representa un comportamiento de interferencia no tecnológica que causa lesión celular de manera inespecífica 1
Contexto en Ensayos Celulares vs. Acelulares
- En ensayos acelulares (cell-free), la agregación coloidal es un comportamiento molesto bien conocido que perturba las proteínas mediante contactos reversibles a través de desnaturalización parcial o completa de la estructura secundaria/terciaria 1
- En ensayos celulares, los compuestos molestos generalmente interfieren causando lesión celular, y muchos mecanismos de acción molestos son consistentes entre líneas celulares y tipos de ensayo 1
- La diferencia clave es que los agregados coloidales quedan atrapados en la barrera de la membrana celular en lugar de ejercer efectos intracelulares 1
Implicaciones Prácticas
- Este fenómeno crea una "caja negra" en los ensayos celulares donde los compuestos pueden producir respuestas aparentemente positivas a través de mecanismos de acción conocidos y novedosos 1
- Se debe tener cuidado al correlacionar lecturas acelulares y celulares, ya que los compuestos de baja calidad pueden mostrar actividad celular "confirmatoria" aparente impulsada por efectos citotóxicos 1
- Una trampa común ocurre cuando se realiza un ensayo de validación bioquímica, se observa una respuesta deseada y luego se equipara la lectura celular original a esta actividad específica 1