From the Guidelines
Pseudomonas aeruginosa için faj üretim prosedürü, hastadan veya çevreden hedef Pseudomonas aeruginosa suşunu izole ederek başlar, ardından fajları besi brothunda inkübe ederek amplifiye edilir ve son olarak saflaştırma işlemleri uygulanır 1. Bu prosedürün amacı, P. aeruginosa'ya karşı etkili olan spesifik fajları elde etmektir.
- İlk adım, hedef Pseudomonas aeruginosa suşunu hastadan veya çevreden izole etmektir.
- İkinci adım, P. aeruginosa'ya karşı spesifik fajları faj kütüphanelerinden veya çevre örneklerinden elde etmektir.
- Üçüncü adım, fajları besi brothunda inkübe ederek amplifiye etmektir.
- Dördüncü adım, lizatın 0.22 μm filtreden geçirilerek bakteriyel artıkların entferilmesi ve fajların korunmasıdır.
- Beşinci adım, fajları ultracentrifügasyon veya polietilen glikol (PEG) ile saflaştırmaktır.
- Altıncı adım, saflaştırılmış fajların hedef suşa karşı etkinliğini test etmek ve endotoksinler ve diğer kontaminanlardan arındırılmasını sağlamaktır.
- Yedinci adım, final faj preparatını kısa süreli kullanım için 4°C'de veya uzun süreli kullanım için -80°C'de gliserol ile saklamaktır. Bu prosedür, bakteriyofajların yüksek spesifiteli virüsler olduğunu ve bakterileri enfekte ederek replike olduğunu, sonunda hücre lizisini ve yeni faj partiküllerinin salınmasını sağlayarak, antibiyotiklere dirençli P. aeruginosa enfeksiyonlarına karşı etkili antimikrobiyal ajanlar haline geldiğini göstermektedir 1. Ayrıca, faj tedavisi, özellikle biofilm oluşturan P. aeruginosa suşlarına karşı etkili olabilir, çünkü fajlar hücrelerin yakınlığı nedeniyle biofilmlerde daha kolay enfekte olabilirler 1. Ancak, faj tedavisinin etkinliğini artırmak için, birden fazla faj veya ek antimikrobiyal ajanların kombinasyonlarının kullanılması gerekebilir 1.
From the Research
Pseudomonas Aerodinamik için Faj Üretim Prosedürü
Pseudomonas aeruginosa'ya karşı etkili fajların izolasyonu ve üretimi için çeşitli yöntemler kullanılmaktadır.
- Faj izolasyonu için en uygun kaynaklar arasında atık sular ve atık suyu içeren ortamlar bulunmaktadır 2.
- Faj üretimi için kullanılan yöntemler arasında, Pseudomonas türlerine özgü fajların izolasyonu, konsantrasyonu, saflaştırılması ve üretimi yer almaktadır 3.
- Fajların etkinliği ve geniş host aralığı, Pseudomonas aeruginosa'ya karşı etkili bir tedavi seçeneği olarak kullanılmalarını sağlamaktadır 4, 5.
- Pseudomonas aeruginosa enfeksiyonlarının tedavisinde faj terapisi, antibiyotik direnci sorununa karşı bir çözüm olarak önerilmektedir 5, 6.
- Faj terapisi, Pseudomonas aeruginosa'nın planktonik ve biyofilmlerine karşı etkili olabilecek şekilde geliştirilmektedir 6.