From the Guidelines
Bakteriyofajların saklanması için optimal koşulların sağlanması hayati önem taşımaktadır. Bakteriyofajların saklanması için kısa süreli depolama (haftalar veya aylar) için 4°C (buzdolabı sıcaklığı) veya uzun süreli korunma için -80°C ile %15-25 glycerol kullanılarak kryoprotektan olarak korunmaları önerilir 1. Ayrıca, liofilizasyon (dondurarak kurutma) da oda sıcaklığında yıllarca稳 định kalmasına olanak tanıyan başka bir excelente uzun süreli depolama seçeneğidir. Bakteriyofaj preparatlarının depolanması sırasında steril konteynırların kullanılması ve tekrar eden donma-çözülme döngülerinin tránh edilmesi önemlidir, çünkü bu durum bakteriyofaj titrerinin önemli ölçüde azalmasına neden olabilir 1. Çalışma stokları için, bakteriyofajlar SM buffer (100 mM NaCl, 8 mM MgSO4, 50 mM Tris-HCl, pH 7.5) gibi tampon çözeltisinde korunabilir, bu da yapılarını ve enfektifliklerini korumaya yardımcı olur. Bu depolama yöntemleri kritiktir, çünkü bakteriyofajlar protein temelli biyolojik varlıklardır ve uygun olmayan koşullarda bozulabilir, bu da terapötik potansiyellerinin kaybına yol açabilir. Depolanan bakteriyofajların aktif kalmasını sağlamak için, özellikle klinik veya deneysel kullanımdan önce, plak assayleri aracılığıyla düzenli canlılık testleri yapılması önerilir.
Bakteriyofajların saklanması ve korunması için bazı önemli noktalar şunlardır:
- Steril konteynırların kullanılması
- Tekrar eden donma-çözülme döngülerinin tránh edilmesi
- Uygun tampon çözeltisinin kullanılması
- Düzenli canlılık testleri yapılması
- Bakteriyofajların protein temelli biyolojik varlıklar olduğu ve uygun olmayan koşullarda bozulabileceği dikkate alınmalıdır 1.
From the Research
Bacteriyofajların Saklanması
Bacteriyofajların saklanması için çeşitli yöntemler vardır. Bu yöntemler arasında:
Dondurma Yöntemi
Dondurma yöntemi, bacteriyofajların -20°C veya -80°C'de saklanmasıdır. Bu yöntemde, poly(ethylene glycol) gibi cryoprotectantlar kullanılarak bacteriyofajların soğuk hasarından korunması sağlanır 2. Ayrıca, freshly infected susceptible bacteria'nın erken aşamalarında dondurulması da bacteriyofajların uzun süreli saklanması için bir yöntemdir 3.
Kurutma Yöntemi
Kurutma yöntemi, bacteriyofajların su içeriğinin azaltılmasıdır. Bu yöntemde, bacteriyofajlar genellikle 50% glycerol içinde saklanır 4. Ancak, kurutma yöntemi bazı bacteriyofajlar için uygun olmayabilir.
Liyofilizasyon Yöntemi
Liyofilizasyon yöntemi, bacteriyofajların su içeriğinin azaltılması ve ardından vakum altında kurutulmasıdır. Bu yöntemde, farklı excipientlar kullanılarak bacteriyofajların stabilitesi artırılabilir 5.
Özel Tampon Çözeltilerinin Kullanılması
Özel tampon çözeltilerinin kullanılması, bacteriyofajların structural bütünlüğünün korunması için önemlidir. Bu çözeltiler, genellikle Mg(2+), gelatin veya ficoll gibi bileşenleri içerir 6.