Preparación del Plasma Rico en Plaquetas (PRP)
El PRP debe prepararse mediante centrifugación de sangre anticoagulada con citrato (preferiblemente citrato trisódico o ACD) utilizando centrifugación a baja fuerza (170-200 g) durante 10 minutos a temperatura ambiente, evitando el uso de EDTA que causa activación plaquetaria. 1
Anticoagulación
- Usar citrato trisódico como anticoagulante de primera elección por sus mínimos efectos negativos 1
- Alternativas aceptables: ACD (Acid Citrate Dextrose) o CPD (Citrate Phosphate Dextrose), incluyendo ACD-A y CPD-A 1
- Evitar EDTA completamente - causa hinchazón y activación plaquetaria prematura 1
Protocolo de Centrifugación
Método Tradicional de Un Solo Paso:
- Centrifugar sangre anticoagulada a 170-200 g durante 10 minutos a temperatura ambiente 1
- Este método proporciona preparación relativamente pura con buen rendimiento plaquetario
Método de Doble Centrifugación (Mayor Rendimiento):
Para aplicaciones clínicas que requieren mayor concentración:
Primera centrifugación:
- 100-160 g durante 10-20 minutos a temperatura ambiente 2, 3, 4
- Esto separa el plasma rico en plaquetas (PRP) de los glóbulos rojos
- Transferir cuidadosamente la capa superior sin disturbar el buffy coat
Segunda centrifugación:
- 250-1600 g durante 10-20 minutos 3, 4
- Concentra las plaquetas en un pellet
- Descartar la mayor parte del plasma pobre en plaquetas superior
- Resuspender el botón plaquetario en pequeño volumen de plasma (típicamente 1/3 inferior del producto final)
Consideraciones Críticas de Preparación
Variables que Afectan la Eficacia:
- La fuerza g y el tiempo de centrifugación determinan significativamente el rendimiento, concentración, pureza, viabilidad y estado de activación plaquetaria 1
- Diferencias en estos parámetros afectarán directamente la eficacia clínica 1
Procesamiento de Muestras:
- Procesar lo más rápido posible, idealmente dentro de 1 hora de la recolección 5
- Mantener a temperatura ambiente durante el transporte 5
- No usar tubos neumáticos - alteran significativamente los parámetros del PRP 5
Contenido Celular:
- El contenido de leucocitos puede impactar significativamente la biología del PRP 1
- Los leucocitos tienen propiedades inmunes, antibacterianas y regulan factores de crecimiento locales 1
- La presencia de glóbulos rojos debe minimizarse (reducción >84-94%) 6
Activación del PRP
La necesidad de activación previa a la aplicación es incierta 1:
- Algunos tejidos ricos en colágeno pueden activar el PRP naturalmente, eliminando la necesidad de activación previa 1
- Métodos de activación cuando se requieren: trombina, recalcificación 1
- La activación libera el contenido de gránulos α y crea andamio de fibrina 1
Estabilidad y Almacenamiento
- El PRP preparado es estable para uso clínico hasta 6 horas después de la preparación (evidencia incierta) 1
- Los factores de crecimiento no son estables en plasma - congelar inmediatamente si no se usa de inmediato 7
- Almacenar a temperatura ambiente (20-24°C) con agitación suave si se mantiene antes de uso 8
Trampa Común
La falta de estandarización es el mayor problema en la preparación de PRP 1. Muchos estudios clínicos no definen claramente las propiedades biológicas del PRP utilizado, llevando a eficacias y resultados variables 1. Siempre documentar:
- Concentración plaquetaria basal y final
- Volumen de sangre procesada
- Protocolo exacto de centrifugación
- Presencia/ausencia de leucocitos
- Método de activación si se utiliza 1